من اختبار ELISA هو فحص مختبري طبي ينتج عنه ما يسمى تفاعل الجسم المضاد للمستضد. يمكن اختبار المستضدات المختلفة التي تلعب دورًا في الطب البشري أو الطب البيطري. في ألمانيا ، يتم تفويض المعاهد المختبرية المعتمدة فقط لإجراء الاختبار.
ما هو الإجراء؟
ELISA هو اختصار لـ انزيم مرتبط المناعي فحص. لذلك فهو اسم باللغة الإنجليزية ، لكنه أصبح راسخًا في الاستخدام الطبي الألماني.
اختبار ELISA هو أحد ما يسمى بالطرق المناعية في الاختبارات المعملية الطبية. يمكن استخدام إجراء الاختبار للكشف عن جزيئات البروتين في مجموعة متنوعة من سوائل الجسم. يسمح اكتشاف هذه الجزيئات بدوره باستخلاص استنتاجات حول أمراض معينة أو صور إكلينيكية ، وهذا هو السبب في أن الأطباء يجعلون تشخيصهم يعتمد أيضًا على نتيجة اختبار ELISA. لذلك فإن إجراء الاختبار مهم للغاية في الممارسة السريرية اليومية ، في العيادات الخارجية أو المرضى الداخليين.
يتم إرسال سوائل الجسم المقابلة ، على سبيل المثال الدم الكامل أو السوائل من المفاصل ، مباشرة إلى المختبر بعد أخذها من المريض. عادة ما تكون العينات عاجلة للغاية ، لأن المادة الأصلية تعتبر حساسة ويجب فحصها في أسرع وقت ممكن. يمكن أن يؤدي ما يسمى بالعينات المتراكبة إلى نتائج سلبية خاطئة لأن البروتينات المرضية التي سيتم اكتشافها في هذه الأثناء قد تم تقليلها أو تفككها بالكامل يلعب ما يسمى بالتحليل المسبق دورًا مهمًا في ELISA ؛ يجب تكرار النتائج المشبوهة أو السلبية مرة أخرى إذا كانت هناك أعراض سريرية.
الوظيفة والتأثير والأهداف
تعتبر أنابيب الاختبار وما يسمى بألواح الميكروتيتر ضرورية للاختبار الصحيح في مختبر طبي معتمد. هذه الألواح ذات المسافات البادئة شبه المقعرة الدقيقة مصنوعة من بلاستيك خاص وكل منها مغطى بجسم مضاد محدد للغاية.
إذا كان المستضد المراد اكتشافه موجودًا في سائل الجسم المراد فحصه ، يحدث تفاعل محدد للمستضد والأجسام المضادة وفقًا لما يسمى مبدأ القفل والمفتاح. يمكن لموظفي المختبر إدخال مادة العينة في اللوحات إما يدويًا باستخدام الماصات أو تلقائيًا بالكامل. في معاهد المختبرات الطبية الحديثة ، يتم استخدام أنظمة مؤتمتة بالكامل فقط لإجراء تشخيص ELISA.
ومع ذلك ، يجب مراقبتها من قبل موظفين مدربين ومساعدي المختبرات الطبية والتقنية. إن ما يسمى بمراقبة الجودة الداخلية والخارجية هو أيضًا من مسؤولية طاقم المختبر ، تحت إشراف الطاقم الطبي للطب المخبري ، ووبائيات العدوى وعلم الأحياء الدقيقة. بعد المحاولة الأولى ، أي بعد أن يتم تمرير المادة على الألواح ، تكون المستضدات المحددة في العينة ، إن وجدت ، قد ارتبطت بالفعل بالأجسام المضادة الموجودة على اللوحة البلاستيكية.
يتبع ذلك دورة غسيل بمحلول ملحي فسيولوجي لإزالة العوامل المدمرة مثل المستضدات أو البروتينات غير المرغوب فيها من الدفعة. هذه الخطوة مهمة للغاية لتجنب ردود الفعل الإيجابية الكاذبة. يمكن أن يكون للنتيجة الإيجابية المفترضة التي أساء المختبر تفسيرها في ظل ظروف معينة عواقب وخيمة على المريض. في الخطوة الثانية من الاستقصاء ، تمت إضافة جسم مضاد آخر مرتبط بإنزيم. يرتبط هذا الجسم المضاد المسمى أيضًا بمولد الضد.
في الخطوة الثالثة والأخيرة ، تتم إضافة صبغة خاصة بكمية محددة ، والتي يتم تقسيمها إلى حد أكبر أو أقل بواسطة بقايا الإنزيم المتبقية. فقط هذا الإنزيم يمكن تحطيمه والذي لم يتم ربطه سابقًا بالمستضد مع الجسم المضاد. الإنزيم الحر قادر على شق الصبغة المضافة. يمكن تحديد الكمية الدقيقة للصبغة المنقسمة بطريقة مخبرية طبية أخرى ، تسمى القياس الضوئي. يتيح ذلك استخلاص استنتاج دقيق حول ما إذا كان مولد الضد موجودًا في مادة العينة وكميته.
لا يتم استخدام اختبار ELISA فقط للتشخيص الأولي أو لتأكيد التشخيصات المشتبه بها في بعض الأمراض والصور السريرية ، ولكن أيضًا لمراقبة تقدمها. إذا انخفض تركيز المستضد في الاختبار أثناء العلاج ، يعتبر العلاج ناجحًا.
يمكنك العثور على أدويتك هنا
➔ أدوية لتقوية جهاز المناعةالمخاطر والآثار الجانبية والأخطار
يعد اختبار ELISA مفيدًا بشكل خاص من خلال اكتشاف الهياكل المستضدية في سوائل الجسم. يسمح الاختبار بما يسمى ببيان نوعي ، ولكن أيضًا شبه كمي وكمي حول الوجود المفترض لمستضدات معينة في سوائل الجسم.
لا يمكن استخدام الدم الكامل للفحص ، فقط مصل الدم. لذلك ، فإن إجراء اختبار مباشر على المريض ، على سبيل المثال من الدم الشعري لأطراف الأصابع ، كما هو الحال مع بعض الاختبارات المصلية الأخرى ، غير ممكن حتى الآن. في الطب البشري ، يستخدم اختبار ELISA بشكل أساسي للكشف عن المستضدات في الالتهابات البكتيرية أو الفيروسية أو الفطرية. بالإضافة إلى ذلك ، يتم فحص جميع النتائج الإيجابية لأمراض التهاب الكبد مرة أخرى باستخدام اختبار ELISA كمعيار.
يمكن أيضًا تحديد هرمونات معينة ، مثل هرمون الحمل HCG ، من خلال اختبار ELISA. في حالة حدوث مضاعفات معينة أثناء الحمل ، فإن المعرفة الدقيقة بتركيز هرمون الحمل في الدم مفيدة جدًا من الناحية التشخيصية والعلاجية. مجال آخر من مجالات الدلالة للاختبار هو الكشف عن ما يسمى بالبروتينات في البول ، كما تحدث ، على سبيل المثال ، في أمراض الأورام المختلفة مثل المايلوما المتعددة.
لا يزال اختبار ELISA يتم إجراؤه في العديد من المعاهد المختبرية حتى اليوم ، ولكن الخبراء يعتبرونه قديمًا. تم استبدال التفاعل المناعي المرتبط بالإنزيم في اختبار ELISA بشكل متزايد في السنوات الأخيرة بأجسام مضادة ذات علامات إشعاعية توفر نتائج كمية أفضل. تُعرف هذه الاختبارات أيضًا باسم RIA ، اختبار الامتصاص المناعي الراديوي. مزيد من التطورات المحددة الأخرى لـ ELISA هي طرق كيميائية خفيفة مثل التلألؤ أو التألق.
